血清肿瘤标志物联合检测在大肠癌诊断及治疗中的意义

检验医师

      肿瘤标志物是在癌变过程中由肿瘤细胞产生、分泌或直接释放细胞组织成分，并以抗原、激素、酶及代谢产物的形式存在于肿瘤细胞或宿主体液。人们可以从血液和其它组织中测出，作为肿瘤标记之目的，为临床早期发现，鉴别诊断，预测肿瘤复发，监测肿瘤疗效提供用途。随着分子生物学标志物的发展，越来越多的肿瘤标志物应用于临床。目前认为血清CA242、CEA、CA19- 9联合检测, 对诊断大肠癌的敏感性好, 检出率高, 这对于肿瘤的早期发现、早期治疗有着非常重要的作用。本文将对这些肿瘤标志物免疫化学检测技术做出综述。

一、大肠癌血清肿瘤标记物

1 癌胚抗原(CEA)

      CEA主要是大肠癌的肿瘤标志物，由Goldt和Freedmaun首次从结肠癌组织中提取，40~70%大肠癌患者CEA呈阳性。CEA是目前研究最广泛的一种肿瘤标志物，在临床应用已有20余年，马道新等报道大肠癌，胰腺癌和胃癌CEA阳性率分别为67.00%、40.00%、70.00%。

      CEA由胎儿早期的胃肠道及肝、胰合成，成人正常消化道也能合成CEA并分泌入肠道。胃肠道肿瘤的细胞由于极性消失，分泌的CEA常反流入血液或淋巴系统，导至血液中CEA升高。CAE多存在于消化器官内胚叶上皮发生的癌细胞及至异型细胞顶端部分，进入血液的量少，直到有癌细胞的静脉侵袭和淋巴管的侵袭时才能发现血浆中CEA水平升高。金星林等报道大肠癌病理分期DukesA、DukesB、DukesC及DukesD  CEA的阳性率分别为18.75%、42.86%、68.18%及94.12%。因此通过CEA水平高低能够了解大肠癌的病期。

      胃癌患者，肿瘤分期越晚，CEA水平越高，病人预后越差，并与淋巴、血运及腹腔转移相关。近年发现肿瘤病人血清CAE升高符合指数曲线，其倍增时间与胃肠道复发肿瘤的实际增长体积相一致，与肿瘤复发后的生存期长短有明显联系，是一个独立的预后指标。而且术后复发患者血清CEA水平的升高比临床症状提前6个月出现，大大提高了复发肿瘤的早期诊断率和切除率。因此，CEA可以作为胃肠肿瘤术后复发的常规检测指标。

2 CA19-9

      CA19-9是前苏联科学家应用结肠癌细胞得到的一种单克隆抗体，被识别的抗原被命名为糖类抗原19-9，其主要由胃癌、肠癌、胰腺癌及肝癌细胞所分泌，因其能与大肠癌的细胞特异性结合，故又称胃肠癌抗原。33%—86%的胃癌组织和54%~90%的结、直肠癌组织中CA19-9呈阳性表达，其表达程度与肿瘤大小、浸润深度及淋巴结转移有关。Kuusela等在39%—46%的胃癌及50%—80%的结、直肠癌病人血清中可发现CA19一9含量升高，CA19一9含量升高的结、直肠癌病人的平均生存时间为10个月。Denilan从胰腺癌病人血清中检测出CA19-9，且发现血清浓度异常增高。血清CA19-9诊断胰腺癌的特异性为90%，敏感性为95%。此后，很多学者都把CA19-9作为诊断胰腺癌的有效指标之一。当胰腺癌根治性切除后，血清CA19-9水平在两周内迅速降至正常范围，如果术后血清CA19-9水平降低后再升高，往往提示有肿瘤复发或远处转移，血清CA19-9水平升高一般发生在有肿瘤复发或转移的临床表现之前2~9个月，这对早期诊断胰腺癌有无复发具有重要意义。

3  CA242

      血清CA242由LindHolm 等通过人类结肠癌细胞得到CA242单抗。近年CA242被作为一种新的肿瘤标志物而广泛应用于临床。胡毅指出CA242诊断大肠癌、胰腺癌和胃癌的敏感性分别为42.86%、73.33%、47.50%，总阳性率为52.65%，诊断胰腺癌的特异性为96.25%。王怀志认为CA242作为大肠良、恶的鉴别诊断标志优于CEA，其灵敏度53.33%，特异度95.24%。CA242还可对术前判断大肠癌临床病理分期及病理组织类型提供有价值的信息。

4  联合检测

      朱玉琨经试验得出采用三项肿瘤标志抗原对大肠癌的联合检测，由于其各自抗原对大肠癌检测的敏感性、特异性、有效性有差异。联合检测达到优势互补的目的有利于大肠癌的早期诊断，也及时为临床对病情、疗效判断提供有价值的资料。

二、免疫化学检测技术

1  辣根过氧化物酶标记的抗癌胚抗原（CEA)的抗体Fab片段间接染色法

      先用未标记的特异性抗体（一抗）与标本中相应的抗原反应，再用酶标记的“抗抗体”（二抗）与已形成抗原抗体复合物的第一抗体分子反应，然后再进行显色反应。优点：用途广泛，只要标记一种抗体，就可以检测多种抗原。一般免疫组化多采用此法。

2  免疫荧光标记法

      （1）直接法：用已知特异性抗体与荧光素结合，制成特异性荧光抗体。直接用于组织抗原的检查。常用于肾穿和病原体的检查。

      （2）间接法：先用特异性抗体（一抗）与组织标本反应，再用间接荧光抗体（二抗）与结合在抗原的抗体结合，形成抗原－抗体－荧光抗体的复合体。是荧光亮度增强，灵敏性高，目前应用广泛。

3  用罗氏Cobase E601 型电化学发光免疫分析仪测定。

来源：检验世界网