随着科学技术的发展，流式细胞术作为体外诊断（IVD）行业的细分检测手段之一，其应用场景不断拓充，可用于血液、免疫、肿瘤等相关疾病的研究与检测。IVD需要“好”的流式抗体，而真正意义上的“好”抗体是如何产生的呢？“好”抗体与应用密不可分，且经过严格设计生产。爱博泰克聚焦流式细胞分析技术，基于革命性的单B细胞SMab®重组兔单抗平台，突破传统杂交瘤单抗技术壁垒，推出全新一代ABflo®流式重组兔单抗。从一个靶点，到一份立项书，再到一支好的兔单抗产品，爱博泰克在抗体开发全流程上严格把控，去芜存菁，匠心打造每一支流式抗体，确保实验结果的准确性、可重复性，助力流式检测项目高效开展！ 01 重组兔单抗优势 对于开发人和小鼠靶点的抗体，兔鼠和兔人的亲缘性关系较远，更易产生免疫应答，加上兔特有的高效免疫系统和基因重排机制，兔对于流式靶点中各类CD表面抗原、多次跨膜蛋白、细胞表面受体、蛋白复合体、蛋白异构体、胞内因子、转录因子等，均能产生高度多样化的高性能抗体。ABflo®全新流式重组兔单抗，超越传统鼠单抗，在流式应用中表现优异。
02 好的流式抗体是什么样的？ （1）特异性高 抗体特异性是评估抗体性能的重要指标之一，高特异性抗体可确保与靶标正确识别，避免与具有相同或相似抗原表位的其他分子发生交叉反应造成的假阳性，可提升体外诊断结果的准确性，避免误诊。ABflo®流式重组兔单抗经多元化样本（如阴性无表达样本、敲除样本、过表达样本、阳性表达细胞系、原代细胞等）验证，拥有高特异性，确保结果可信。同时，ABflo®流式抗体质检过程中，会严格与市场传统品牌对标检测，以确保上线产品优于或达到市场广泛使用水平。
结果显示，同等实验条件下，爱博泰克流式重组兔单抗检测阴性对照样本HUVEC细胞无信号跃迁，同时在阳性样本人PBMC中信号跃迁明显且优于竞品，抗体特异性很好。
结果显示，爱博泰克流式重组兔单抗检测HeLa-LAMP2基因敲除细胞，无信号跃迁，在未经敲除的HeLa阳性细胞信号跃迁明显，说明抗体特异性很好。 （2）极佳信噪比 爱博泰克的每一支ABflo®流式重组兔单抗都经过了内部严格的最佳用量摸索实验，有着极佳的信噪比。同时考虑到实际应用场景的多样性，我们在ABflo®抗体的最终制剂中给了足够的浓度冗余来重现我们的验证结果，也为您的检测优化提供更大自由度。 ABflo® 594 Rabbit anti-Human CD62L/L-Selectin mAb (A24632)
结果显示，采用不同浓度的ABflo® 594标记的CD62L流式抗体，在Human PBMC样本上进行滴定实验，并分别计算出不同浓度下阴、阳性细胞群体的MFI值（平均荧光强度）及其SNR值（信噪比）。在156.25 – 5 000 ng/mL的范围中，我们的抗体均可以对PBMC有效分群，有着优异稳定的信噪比。 （3）细胞分群清晰 ABflo®流式重组兔单抗，依托严格的多元化抗体质检平台，精选优质克隆上架，确保抗体拥有良好的特异性、亲和性，稳定性，和样本兼容性，实现对原代细胞表面和胞内天然蛋白的精准识别；多样化的ABflo®系列荧光染料，光稳定性好，能耐受激光光源的激发，可以保持长时间的荧光信号，具有一致的发射光谱且光谱窄，可尽量避免与其他染料的光谱重叠，提高检测的特异性和灵敏度，为多色流式组合检测提供更多搭配选择；同时，爱博泰克提供精选验证的流式Panel，性能稳定，方便快捷，可帮助您获得清晰的细胞分群结果。 Human TBNK Panel 货号RK40002
结果显示，CD45、CD3、CD19、CD56、CD4、CD8a多色实验，检测人PBMC样本，CD45+ CD3+ T细胞、CD45+ CD3+ CD4+ Th细胞、CD45+ CD3+ CD8+ CTL细胞、CD45+ CD3- CD19+ B细胞、CD45+ CD3- CD56 bright NK细胞、CD45+ CD3- CD56dim NK细胞、CD45+ CD3+ CD56+ NKT细胞分群清晰。 （4）批间一致性高 ABflo®流式重组兔单抗，经由体外重组表达批量生产而来，高度可控且可靠的生产流程赋予了ABflo®流式重组兔单抗高度稳定的批间一致性，确保检测结果的可重复性，规避传统杂交瘤系统开发单抗和生产过程中遗传漂移及不稳定性对批次差异的影响。
（5）纯度高 抗体纯度与抗体性能密切相关，如抗体特异性、信号值、背景值等，高纯度重组抗体有助于确保检测结果的可靠性。ABflo®流式重组兔单抗纯度经由SDS-PAGE（还原样本与非还原样本）检测和SEC-HPLC定量纯度检测，抗体单体纯度可达98%以上。
结果显示，SEC-HPLC定量纯度检测，抗体纯度>98%。 （6）稳定性好 稳定性是体外诊断试剂确保产品安全有效的关键指标之一，抗体的稳定性极大地影响了其性能，如特异性和亲和力。ABflo®流式重组兔单抗开发过程中，会将抗体置于37 ℃进行加速破坏实验，考察抗体的稳定性（一般认为试剂37 ℃存放7天、10天、14天，分别相当于4度放置1年、1.5年、2年）。
结果表明，经过稳定性测试的抗体在4 ℃及37 ℃分别储存7天、10天、14天后，信号跃迁高度一致，产品具有良好的稳定性。 03 优质的ABflo®流式重组兔单抗是怎样达成的? 爱博泰克基于自有知识产权的单B细胞抗体开发SMab®平台，作为流式抗体开发的核心技术平台。
主要开发流程简介： （1）抗原免疫 根据靶点背景及研发目标，运用爱博泰克十多年积累的抗原设计思路与经验，并采用多元化的抗原免疫策略，如真核活性蛋白、稳转细胞株、LNP-mRNA、修饰性多肽、小分子抗原等，对兔子进行免疫。 1.真核活性蛋白免疫 流式检测的是天然状态下的蛋白，高活性的优质抗原为筛选得到优质的流式抗体奠定了坚实的基础。爱博泰克拥有高通量真核表达平台，能快速高效地制备出符合免疫标准的高活性蛋白。 PE Rabbit anti-Human CD25 mAb (A23712)
包被人重组蛋白CD25，2 μg/mL（100 μL/well），能与人重组蛋白 IL-2结合，线性范围为 5-30 ng/mL。
2.稳转细胞株免疫 流式检测的靶点中较多为表面标志物，多次跨膜蛋白的体外表达，因其缺乏足够的插膜及折叠过程，异源过表达时经常出现表达量低或不表达的情况，也较难获得稳定的纯化蛋白。针对一些较难获取蛋白的多次跨膜靶点，爱博泰克探索并建立了稳转细胞株作为抗原来免疫兔子，打破抗体研发中的困局，筛选出优质用于流式检测的兔单抗。 ABflo® 647 Rabbit anti-Human Claudin18.2 mAb (A23392)
NUGC4 cells ABflo® 647 Rabbit anti-Human CD9 mAb (A24157)
3.LNP-mRNA免疫 G蛋白偶联受体 (GPCRs), 属于七次跨膜蛋白，是哺乳动物基因组中最大的膜蛋白家族，参与机体的发育和正常的功能行使。可以特异性识别GPCR的单克隆抗体的开发，在肿瘤的诊断和治疗领域也变得愈发炙手可热。靶向GPCR的诊断抗体或抗体药开发难度大，逐步成熟的mRNA抗原免疫抗体开发平台可用于多次跨膜蛋白抗体的开发。细胞质中mRNA可直接翻译，在哺乳动物细胞中可自发进行翻译后修饰，天然构象，靶抗原丰度高，可以产生有效免疫。
HeLa cells (negative control) Human PBMC （2）细胞分选 利用爱博泰克独有的组合式B细胞分选富集策略，在最新型流式分选设备的支持下，可以有效富集特异识别抗原的B细胞，提升其在体外培养的成活率，最大程度保留兔B细胞的多样性，为开发满足不同应用的抗体提供了更多的可能性。
爱博泰克抗体事业部Beckman Cytoflex SRT流式分选仪 及“万抗计划”候选细胞株分选 （3）功能验证筛选 在抗体开发中，爱博泰克研发团队投入一系列设备平台深度评估抗体性能，从而更准确更快速地筛选到所需要满足的目标应用的优质重组兔单抗。 LAMP2抗体功能验证筛选
04 持续探索革新的ABflo®流式重组兔单抗 爱博泰克密切关注生命科学发展动态，深度分析行业痛点，谋新求变；持续探索革新的ABflo®流式重组兔单抗，为IVD检测提供创新解决方案。 （1）PolymAb® 混合流式兔单抗 PolymAb®混合流式兔单抗是精选针对同一靶点，识别不同表位的优质重组兔单抗，按照不同比例混合后多次严格验证筛选得到的单抗组合产品，将多抗可识别多个抗原表位和单抗稳定性高、重复性好的优势相结合，且重组单抗容易量产，可实现产品性能稳定和持续供应。PolymAb® 混合单克隆抗体作为体外诊断原料和产品，在临床应用中增加微小残留病的检出率，降低漏检。 ABflo® 488 Anti-Human CD38 PolymAb® -货号A25390
（2）定点标记技术，打造抗体极致性能 ABflo®系列流式抗体采用新一代定点标记技术，可实现对抗体特定位点进行标记，获得均一性更好，灵敏度更高，效价更出色的极致性能流式重组兔单抗。
结果显示，采用定点标记技术获得的PE Rabbit anti-Human CD45 mAb流式重组兔单抗，检测人PBMC样本，相比于常规标记抗体，在不同浓度梯度下检测，整体信号跃迁程度更强；且在抗体使用终浓度低至约78 ng/mL时，仍旧有明显信号跃迁。新一代定点标记技术为开发更多高品质ABflo®流式重组兔单抗提供了强有力的技术支撑。 爱博泰克秉承将中国优秀的工具产品销往全球的愿景，凝聚中国力量，立足自主知识产权，愿和各位同行携手推动中国生命科学工具产业的快速发展，为世界科学进步持续注入中国智慧。 ABflo®系列免疫分型优质流式重组兔单抗（节选）
ABflo®系列免疫检查点优质流式重组兔单抗（节选）
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扫码了解更多ABflo®流式抗体！ ABclonal公司简介 爱博泰克生物科技有限公司（ABclonal Technology Co.,Ltd.）成立于2011年，作为生命科学解决方案的提供商，旨在为更多的科研工作者、IVD企业、新技术开发企业提供抗体、酶、NGS产品和蛋白制品等全套解决方案。 ABclonal现有波士顿抗体与蛋白研发中心、上海诊断与科研分子酶产品研发基地以及中国武汉光谷诊断与科研免疫产品生产和研发基地。经过多年的深耕与发展，ABclonal已拥有免疫与分子酶两大技术平台，集新型分子酶、全领域应用NGS建库解决方案、新平台单克隆抗体与高活性蛋白制品的研发与生产于一体。ABclonal致力成为产业科研转化的核心企业，向生命科学研究工作者和应用企业提供全套可靠的技术解决方案。
Tel:400-999-6126 Web:www.abclonal.com.cn Email:cn.market@abclonal.com |
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