开发 | 传统的侧向层析试剂介绍
2024-4-1 00:06|
编辑: 小桔灯网|
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摘要: 侧向层析试剂包含几个关键部件：►样品垫：提供样品吸收，并控制样品在结合垫上的分布和流动；►结合垫：用于分配和干燥纳米粒子-抗体共轭物的介质，有助于控制重新溶解的共轭物释放到硝酸纤维素膜上；►硝酸纤维 ...
| ► 样品垫：提供样品吸收，并控制样品在结合垫上的分布和流动；► 结合垫：用于分配和干燥纳米粒子-抗体共轭物的介质，有助于控制重新溶解的共轭物释放到硝酸纤维素膜上；► 硝酸纤维素膜：为固定测试和质控线试剂提供理想的固相载体；► 吸水垫：提供均匀的毛细血管流经膜，吸收应用的样品，并防止回流。传统的侧向层析试剂包含一个样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和一个吸水垫，它们都被贴在一个背胶卡上（图3）。图3 | 一般侧向层析试剂测试的示意图。样品垫吸收样品并将样品输送到结合垫上。结合垫包含干燥后的抗体-纳米粒子共轭物。硝化纤维素膜上有检测线和质控线，显示检测结果。吸水垫继续以均匀的速度将样品拉过条带。所有部件都组装在一张底卡上。所有这些部件之间的可控重叠使样品通过毛细作用在试纸上移动。试纸条组件通常被放置在一个塑料盒内，因此最终用户只能看到样品垫和带有测试和质控线的硝酸纤维素膜。在样品垫上滴几滴液体，在很短的时间内（2~20分钟）出现或不出现检测线，表明目标分析物的存在或不存在。侧向层析试剂检测的核心是「共轭物」，也被称为检测纳米粒子或指示剂。这些颜色鲜艳的纳米粒子被抗原/抗体功能化，大多数是抗体，能识别目标分析物（例如怀孕测试中的HCG）。检测的读数发生在硝酸纤维素条上，其表面有两条条纹：一条检测线和一条质控线。检测线包含一个固定的抗原/抗体，它要么与目标分析物结合，要么与目标分析物竞争结合，以显示阳性或阴性结果。质控线包含一个固定化的抗体，通常是一种物种特异性的抗IgG，无论分析物是否存在，它都会与颗粒表面的抗体结合，以确认检测工作的正确性。待分析的样品（血液、血清、血浆、尿液、唾液或溶解的固体）被添加到样品垫上，通过毛细作用被拉过侧向层析试剂。样品垫可以过滤样品中不需要的部分（如红血球或固体颗粒），并在样品到达共轭物之前根据需要使样品的pH值正常化。纳米粒子共轭物在与水样接触时被溶解，并能与感兴趣的分析物（如果存在）结合。纳米粒子和样品继续流经硝化纤维素膜，直到到达检测线和质控线。检测线上的结合提供了一个视觉指示，表明分析物是否有足够高的数量从而被检测到。
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