图片来源:Scientific reports 主要内容 OC中循环cfDNA和 cf-miRNA的水平总体上调 研究团队首先评估了与良性病变患者或健康女性相比,OC患者是否具有更多的cfDNA和cf-miRNA量。使用独立的分离方法从匹配的血浆样品中分离出cfDNA和cf-miRNA。因为健康对照组和良性组之间没有差异,两组合并称为“非恶性”。结果显示,与非恶性组比较,OC病例中cfDNA和cf-miRNA的数量显著增加(下图A,B),且循环cfDNA和miRNA的总量呈正相关(下图C)。 循环cfDNA和cf-miRNA在OC中上调。 图片来源:Scientific reports 循环cf-miRNA而非cfDNA 是OC生存率的独立标志物 最近的研究表明,cf-miRNA的总水平在乳腺癌和OC中都具有预后价值。由于在OC中cfDNA水平与cf-miRNA水平相似地增加,假设cfDNA水平也可能与患者的预后有关。 血浆用于两种分析(n = 72),结果表明cf-miRNA水平与生存率显著相关。但cfDNA水平与生存率不显著相关。使用grade、CA-125、R status、FIGO分期和年龄作为分类变量进行了单变量和多变量cox回归分析。在单变量分析中,只有cfDNA和cf-miRNA水平是生存率的重要预测因素。在包括FIGO分期、cfDNA和cf-miRNA水平在内的多变量分析中,只有cf-miRNA仍然是生存率的重要独立预测因子(下图C,D)。但cfDNA和cf-miRNA均与无进展生存期无显著相关性。 循环miRNA是OC的预后生物标志物。 图片来源:Scientific reports 循环miR-200c和miR-141是 OC的替代标志物与不良临床特征相关 接下来,研究团队着手了解哪些miRNA使OC患者总miRNA水平的增加。此前曾鉴定出7种miRNA可以作为OC的诊断标志物。其中miR-200c已经被证明在OC中上调。由于miR-200c通常与miR-141共同转录且共同表达,作者通过qRT-PCR分析了OC血浆和匹配组织中这两种miRNA的表达。在OC的血浆和组织中,miR-200c和miR-141均显著增加(下图A,B)。此外,miR-200c和-141循环水平的增加与许多不良临床特征显著相关,突出了它们作为OC替代标志物的潜力(下图C)。 循环miR-200c和miR-141是OC的潜在替代标记物。 图片来源:Scientific reports miR-200c和miR-141的 启动子甲基化与组织表达水平相关 与良性疾病相比,肿瘤组织的基因组DNA中存在高度显著的启动子低甲基化(下图A),这与匹配组织样本中miR-200c过度表达显著相关(下图B)。但在血浆样品中观察到miR-200c启动子甲基化没有显著差异(下图C)。总的来说,与组织相比,血浆中甲基化的变化要广泛得多,在匹配的血浆cfDNA甲基化和miRNA表达之间观察到轻微但显著的相关性(下图D),这表明至少在一定程度上,cfDNA的甲基化图谱反映了原发性肿瘤的甲基化谱。总之,cfDNA中miR-200c启动子的甲基化部分反映了OC中肿瘤组织的甲基化。 miR-200c启动子甲基化与组织中的表达相关。 图片来源:Scientific reports 总结与讨论 这篇文章是OC中仅有的同时研究cf-miRNA、cfDNA、全血和匹配组织样本的研究。与cfDNA相比,研究团队再次证明了cf-miRNA水平作为生存的独立预后标志物的潜力,还提出了两种循环miRNA有潜力作为OC的替代标志物。研究结果表明,在OC中,循环miRNA可能是比cfDNA更合适的液体活检标记物,未来应探索与其他标记物(如蛋白质或突变)的组合,以评估疾病诊断和治疗监测的选择。 与总cfDNA相比,cf-miRNA更适合作为OC的替代标志物和理想的血浆生物标志物。首先,miR-200c在内的miRNA在血液中高度稳定,可以从200µl的血浆中获得,通过简单的扩增方法很容易在健康和患病个体中检测到。相反,在健康个体中很难检测到cfDNA,分析所需的血液量至少为2毫升。与cfDNA甲基化相比,cf-miRNA更能代表相应的组织。miR-200启动子在一组与miRNA表达密切相关的组织中显著低甲基化。 尽管两种核酸的相关性很显著,但miRNA水平在临床特征方面超过了cfDNA。特别是,miRNA水平与OS密切相关,之前在OC和乳腺癌中都表明了这一点。作为预后标志物,cf-miRNA可能比传统的活检更具信息量。对此的一个潜在解释可能是由于miRNA在循环中的保护作用。DNA片段从肿瘤或血细胞中释放,而miRNA要么被包装到细胞外小泡中,要么以蛋白质复合物的形式从细胞中输出。这些机制可以保护cf-miRNAs免受降解,并可能解释为什么它们对癌症的特异性比对cfDNA的特异性更好。 点“在看”给我一朵小桔花 |