寡核苷酸合成的底层技术 亚磷酰胺三酯合成法 寡核苷酸合成是许多分子生物学应用的基础,包括聚合酶链反应(PCR)、基因编辑、DNA测序和治疗/药物输送。在过去35年里,我们在诊断检测、生物技术和药理学方面所看到的科学进步,部分是由寡核苷酸合成方面的进展所支持的。 现今大多数商业化DNA合成仪所使用的底层技术是亚磷酰胺三酯合成法(如图一),一般称为柱式合成。此方法具有高效、快速偶联等优点,在DNA化学合成中广泛使用。 DNA化学合成不同于酶促的DNA合成过程从5’→3’方向延伸,而是由3’端开始。先将酸活化的脱氧核苷亚磷酰胺分子耦合到一个固定在固相(一般是硅材质表面)的脱氧核苷酸分子上。在第一个合成循环中,核苷酸链从第一个固定在表面上受保护的核苷酸分子开始延伸。其中,经常采用的固定化表面主要是可控孔度玻璃( CPG)或者聚苯乙烯微珠(PS beads)。试剂被泵入并流经材质表面,诱导分步添加的核苷酸单体加入到寡核苷酸链上,使寡核苷酸链不断延长。 图1. 磷酰胺三酯法合成循环示意图 具体反应步骤如下: 那么,如果实现这一连串的步骤呢? DNA 合成仪就是将上述一系列化学合成过程进行自动化,精准可控的设备。仪器主要由试剂驱动系统、试剂瓶组、碱基瓶组、压力管路及输送管路、亚磷酰胺瓶、压力排气管、输送电磁阀、辅助真空、合成柱、路节流阀、废液瓶、排气装置、电导池、电池、控制器等多个部分组成。LGC Biosearch Technologies™的核酸化学产品线 (NAC – Nucleic Acid Chemistry) 旗下 MerMade™ 核酸合成仪系列,可以满足不同合成规模,通量和种类的需求,其中MerMade 6/12 合成仪是广受认可的型号,为合成必备。 MerMade™ 6/12 寡核苷酸合成仪,专为使用标准或改良的化学方法以合成柱的形式合成 DNA,RNA 和 LNA 寡核苷酸而设计,非常适合需要中等通量且最大灵活性的实验室。该仪器已在许多大学、以及 cGMP 环境下运行的制药和诊断公司中使用。该机器有 6 个或 12 个合成柱位配置,可提供多达 24 个酰胺位置。它能够在同一轮中将标准寡核苷酸,简并寡核苷酸和修饰寡核苷酸组合在一起生产,规模从 50nmol 到 200µmol(在某些CPG载体下可超过 400µmol)不等。 让我们来仔细看看,它的标配特性和可选特性: MerMade™ 6/12 能够在保证通量的同时,给您的实验提供最大程度的灵活性,不仅为您的实验带来便捷,更节省了您的时间。 此外,我们还提供4柱、48柱、192柱合成仪,以及一站式核酸合成试剂耗材,满足不同合成规模,通量和种类需求,详细见下表: 以上的“秘籍”,你get了没~ 如果想要进一步了解,这里偷偷放个彩蛋~ 一个彩蛋! 今年5月28-30日即将在英雄城南昌举办的第20届CACLP博览会,LGC基因组学也会倾情参与,期待您莅临A6-0505展位,共探分子诊断的前沿技术发展,还有内容囊括小RNA建库、核酸合成、核酸分子检测方法开发、及核酸提取的卫星会等您到来! 以下是日程,建议保存哦: 请大声喊出析析的展位号:A6-0505 !!! 公 司 介 绍 LGC, Biosearch Technologies LGC Biosearch Technologies提供完整的基因组学产品组合,包括基因组分析工具、仪器和服务,以支持全球客户的关键应用。我们还能提供PCR、核酸提取和NGS相关试剂耗材,为您的实验过程排难解忧。 艾吉析科技(上海)有限公司 地址:上海市静安区北京西路968号 嘉地中心9楼901-903室 官网:www.biosearchtech.com 邮箱:genomics.china@lgcgroup.com 免费热线电话:400 921 6156 |