技术｜肿瘤中的免疫测定

检测与癌症有关的标志物的免疫测定是肿瘤学的常见做法。

肿瘤标志物经常被用于监测疾病和制定治疗计划，在较小程度上用于诊断目的。在本文中，我们将回顾临床上建立的肿瘤标志物和相应的免疫测定。

甲胎蛋白（AFP）是一种通常由胎儿肝脏产生的糖蛋白；然而，它在肝细胞癌（HCC）、生殖细胞肿瘤和精原细胞瘤患者的血清中经常升高。血清水平超过500 ng/mL的患者被认为是HCC的高危人群，但是，小肿瘤（≤3厘米）患者的AFP水平可能是正常的。正常的AFP水平设定在10到20 ng/mL之间，而中间的血清浓度表明是良性肝病。

大约20%的肝病患者会产生HCC。在免疫测定中，血清AFP水平大于20 ng/mL，对诊断HCC的特异性和灵敏度分别为80 ~ 94%和41 ~ 65%。该试验的阴性预测值在98%；但是，阳性预测值很低，只有25%。

AFP免疫测定也被用作肝移植患者的预后生物标志物，当AFP水平>1000 ng/mL时，用于预测疾病的复发，并用于睾丸癌生殖细胞肿瘤的分期。

前列腺特异性抗原（PSA）是一种在正常和肿瘤性前列腺组织中表达的糖蛋白。由于正常的前列腺结构被破坏，PSA可以「泄漏」到血液中，这在前列腺癌中很常见。

血清中的PSA水平升高是前列腺癌的标志；但是，在健康男性中也可以发现，这反映了前列腺的大小和年龄及种族背景。

PSA值为4.0 ng/mL时，可检测出21%的所有前列腺癌和51%的高级别前列腺癌，估计特异性为91%。

尽管血清PSA是前列腺癌的有效标志物，但目前正在开发测试，以提高免疫测定中PSA的灵敏度和特异性。最近设计了一些新的策略来提高传统测试的准确性，包括连续的PSA分析，评估老年男性癌症患者与健康老年男性PSA水平的加速上升，以及测量PSA水平与前列腺大小的关系。

然而，在更好地了解PSA分子的基础上，人们对开发新型免疫测定也有浓厚的兴趣。测量血液中循环的游离和结合的PSA的方法；与α-1-antichymotripsin结合的复合PSA；PSA前体的循环片段，特别是（-2）proPSA异构体；和糖基化的抗原异构体。

3.1、CA 125

CA125是一种糖蛋白抗原，在患有卵巢癌的妇女血清中会升高。

在无症状的绝经后妇女中，血清浓度≥30 U/mL可预测卵巢癌风险增加。大约一半的早期卵巢癌妇女可以发现CA125水平升高，更多的是在晚期疾病中。

然而，该标志物的特异性相当低，在1%的健康妇女中可以发现血清水平升高，但在卵巢、子宫、乳腺的恶性肿瘤和包括子宫内膜异位症在内的良性疾病中也有发现。

尽管如此，CA125免疫测定通常用于卵巢癌筛查，而且在连续的血清测量中，该标记物的有效性会提高。

3.2、CA 15-3和CA 27-29

CA 15-3和CA 27-29是MUC-1基因的产物，在乳腺癌中都会升高。相应的免疫测定具有良好的特性；但是，最近的ASCO指南推荐这两种标志物仅用于监测选定的转移性乳腺癌患者。

3.3、CA 19-9

CA 19-9是一种碳水化合物抗原，在胰腺癌、胆管癌、肝细胞癌中升高，在结肠直肠癌、胃癌和其他癌症中也有较低程度。CA 19-9血清水平>37 U/mL，对胰腺癌患者的总体灵敏度和特异性约为80%和90%。

此外，与CA 125标记物的联合免疫测定经常被用来区分临床上相似的胰腺癌和胰腺炎症。

癌胚抗原（CEA）是一种在胎儿发育期间正常表达的糖蛋白。虽然在成年后被抑制，但它可以在某些癌症中重新表达并分泌到血液循环中。在结直肠癌、甲状腺髓样癌、胆管癌和乳腺癌中可以发现血清CEA水平升高。

然而，CEA也可因吸烟和其他良性疾病如胃炎、肝病和糖尿病而升高。由于CEA缺乏特异性，不建议将其作为诊断标志物；然而，它是唯一常规用于结直肠癌监测和预测术前水平超过5 ng/mL时预后较差的标志物检测。

人绒毛膜促性腺激素（HCG）由滋养细胞产生并分泌到睾丸癌生殖细胞肿瘤患者的血液中。HCG是由一个独特的145个氨基酸的β亚单位和92个氨基酸的α单元组成的二聚体，这在其他垂体激素中也有发现。

临床免疫测定针对独特的β单元及其异构体，通常使用两种抗体，一种是捕获抗体，另一种是镧系或放射性标记的抗体，用于免疫测定。

80 ~ 85%的非精原细胞瘤患者和25%的精原细胞瘤患者血清中的β-HCG水平都有升高的现象。这些患者的β-HCG水平比正常水平的5-10 IU/L高出约20%。该检测方法具有极高的灵敏度（100%）和特异性，很少出现假阳性结果。

β-HCG可用于支持睾丸癌的诊断；然而，其主要好处在于对疾病进行分期。

副肿瘤性疾病是罕见的、非转移性的肿瘤表现，与异常表达的肿瘤抗原的特异性血清抗体有关，这些抗原通常只由神经系统表达。

重要的是，副肿瘤性疾病可以在恶性肿瘤发病前表现出来，从而可以根据神经系统症状和副肿瘤性抗体检测出隐匿的肿瘤。

ANNA-1和CRMP-5阳性的患者主要是患小细胞肺癌（SCLC）和胸腺瘤；PCA-1抗体可能在乳腺癌、卵巢癌和子宫癌之前出现；PCA-2和ANNA-3抗体可能在SCLC和非小细胞肺癌（NSCLC）之前出现；Amphiphysin抗体可能在SCLC和乳腺癌之前出现；ANNA-2抗体可能在SCLC、NSCLC和乳腺癌之前出现。

目前正在研究检测新的自身抗原小组，这可能作为癌症的诊断标志物发挥重要作用。

免疫测定在临床上是不可缺少的，有助于检测、监测和确认许多不同的疾病过程。疾病标志物的检测限度、灵敏度和特异性必须在质量控制的实验室中心进行验证，以确保对结果的可靠解释。

尽管这种基于抗体的实验室检测在所有疾病领域都是常规使用的，但它们往往需要结合病人的病史和临床检查来解释。

识别新型标记物的全球驱动力给免疫测定的发展带来了许多挑战，其中通过微创技术识别疾病的潜力最大。随着二级和三级转诊中心的压力越来越大，初级保健环境正成为实施护理点和微型设备的一个有吸引力的选择。

目前正在开发大量的纳米和微型技术，这些技术利用最少的病人样本，并有可能在初级保健层面使用。随着生物分析方法和生物标志物发现的进步，与疾病相关的新型分子生物标志物将推动高度创新的灵敏免疫测定的发展，以更有效和更具成本效益的方式识别高危患者。