流式细胞检测就是利用流式细胞仪将液流中标记上荧光染料的单细胞或者其他微生物粒进行高速精准定量分析以及分选的生物学性质检测手段。 简单讲：将不同细胞标记上不同荧光染料，带有荧光标记的细胞排成长长的队，等待流式细胞仪的检阅，随后各个细胞经过激光发出五彩荧光，从而被流式仪分选采集出，通过荧光抗体将坏蛋细胞揪出来。 流式细胞检测可以快速、精准分析上万个细胞，涉及到环境微生物检测、常规细胞功能检测领域，临床疾病诊断方向。 流式常用荧光染料 在流式细胞检测技术发展的几十年中，荧光成为了其发展轨迹上重要代名词之一。 在流式细胞检测实验中，应用各种荧光素标记抗体是必不可少的。那么最常用的流式荧光染料有哪些呢？ 这类染料是最具有历史、应用最广泛且相对较小的荧光化合物。有了国外研究基础，国内公司也陆续开始拥有自己专属染料。
从各种藻类中提取的大蛋白分子。与化学合成荧光染料相比，藻胆蛋白荧光量子产率超过90％、具备相对高的消光系数，且能够发出强烈荧光信号。
在聚合物染料没出现之前，PE和APC是最亮的染料，也是搭配低丰度抗原最佳选择。不过，藻胆蛋白很容易受光漂白影响，因此不推荐长时间或反复暴露于激发源的应用。 一个具有供体染料分子的激发和受体染料分子的发射性质的独特荧光基团。
利用荧光共振能量转移（FRET）的现象，即两个荧光分子中供体的发射光谱与受体的激发光谱重叠，且位置上距离很近时，会产生能量的转移情况，此时供体荧光分子的荧光信号发生淬灭，而受体荧光分子的荧光强度显著增强。
比起单分子染料，串联染料不仅在荧光亮度上明显增强，还可在单一激发器中实现更大的发射波长，使得检测红外区域的光谱成为可能。一个激发光源就可以使用多个染料进行研究，这依赖于串联染料扩展斯托克斯位移值（150-300 nm），即激发与发射波长的差值。 随着科研、IVD领域技术势头飞速发展，仪器不断地迭代更新，流式细胞检测技术手段已经十分成熟，仅仅单激光、单通道的流式分析，已经不能满足科研人员需求，目前的单激光、多通道流式检测技术，无论在免疫疗法、细胞分选、生物制药等其它领域都受到高度青睐。 串联染料为单激光、多通道流式检测创造可行性。 使用串联染料时，要注意其敏感性，很容易受光漂白降解，从而导至在单一激发器下受体荧光分子的发射光减弱而供体荧光分子的发射光增强，得出错误实验结果。 不过，把握以下两点可以在实验过程中有效地预防和减缓！
UElandy提供的串联染料非常适合于流式抗体标记，具有水溶性大、无毒性、荧光量子产率高、斯托克斯位移大、荧光明亮、荧光不易淬灭等优势，不仅可检测低丰度靶标，还可实现流式多色搭配。 |
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