一览丨最全病原微生物检测技术

病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体。病原体中，以细菌和病毒的危害性最大。

感染是导至人类发病和死亡的主要原因之一，20世纪早期，抗菌药物的发现改变了现代医学，让人类有了对抗感染的“武器”，也使得外科手术、器官移植和治疗癌症成为可能。然而，引起感染性疾病的病原体种类非常多，包括病毒、细菌、真菌和其他微生物，为了提高各种疾病诊断、治疗效果，保障人们身体健康，就要求临床检验技术更加准确、快速。那么微生物检测技术有哪些呢？

对病原微生物进行传统检测的过程中，大都需要进行染色、培养，并在此基础上进行生物鉴定，以便能够鉴别不同种类的微生物，检测价值较高。传统检测方式主要包括涂片镜检、分离培养与生化反应、组织细胞培养三种。

病原微生物体形体积微小，大多无色半透明状，将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。直接涂片染色镜检简便快速，对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用，例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。直接进行图片镜检的方式检查速度较快，能够对于形态特殊的病原体进行直观的检查，不需要特殊的仪器和设备，在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。

分离培养主要用于存在多种细菌时需要将其中一种细菌分离的情况，多用于痰液、粪便、血液、体液等，由于细菌生长和繁殖的时间比较长，所以该检验方法需要一定的时间，且不可批量处理，所以医学领域不断对此进行了研究，采用了自动化的培养和鉴定的器械，对传统的培养方式进行了改善，提升了检测的准确性。

组织细胞主要包括衣原体、病毒和立克次体等，由于不同的病原体内的组织细胞种类不同，所以从病原微生物中活体取出组织细后需采用传代培养的方式进行活细胞的培养，进而再讲培养的病原微生物接种到组织细胞中进行培养，以尽可能的减少细胞的病变。此外，也可以在培养组织细胞的过程中，可以将病原微生物直接在敏感动物体内接种，再根据动物的组织器官出现的改变对病原体的特质进行检验。

随着我国医疗技术水平的不断提高，分子生物检测技术发展进步，其能够有效的对病原微生物进行鉴定，还能够改善传统检测过程中应用外部形态和生理特征进行检测的现状，能够采用特有的基因片段序列对病原微生物的种类进行鉴别，所以基因检测技术以其自身独到的优势被临床医学检验领域广泛应用。

聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction，PCR)是一种在体外是用已知寡核苷酸引物引导未知片段中微量待测基因片段并进行扩增的技术。由于PCR可以对待测基因进行扩增，特别适用于病原体感染早期的诊断，但是如果引物特异性不强，可能会造成假阳性的出现。PCR技术在近20年里发展迅速，从基因扩增到基因的克隆和改造以及遗传分析，可靠性逐步提高。该方法也是本次疫情新冠病毒的主要检测方法。

基因芯片(Gene chip)技术是指通过微阵列(Microarray)技术将高密度DNA片段通过高速机器人或原位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如膜、玻璃片等固相表面，以同位素或荧光标记的DNA探针，借助碱基互补杂交原理，进行大量的基因表达及监测等方面研究的技术。将基因芯片技术应用到病原微生物的诊断中，可明显缩短诊断时间，同时还能检验出病原体是否存在耐药性，以及对哪些药物耐药，对哪些药物敏感等，从而为临床用药提供参考。但是该项技术的制作成本较高，芯片检测的敏感性也需提高，所以该项技术还住哟用于实验室研究，未能在临床中得到广泛应用。

核酸杂交是病原微生物中具有互补序列的核苷酸单链在细胞内融合形成异质双链的过程，导至发生杂交的因素是核酸与探针发生化学反应，从而对病原微生物进行鉴定。目前用于对病原微生物进行检测的核酸再交技术主要有核酸原位杂交和膜上印迹杂交。核酸原位杂交是指病原体细胞中的核酸与标记探针进行杂交。膜上印迹杂交是指实验人员将病原体细胞的核酸分离出后，将其进行纯化后与固相支持物相结合，然后与核算探针进行杂交。核算杂交技术具有操作方便、快速的优点，而且适用于敏感、特意的病原微生物。

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采用血清学检测能够对病原微生物进行快速鉴定，血清学检测技术的基本原理是通过已知的病原体抗原以及抗体对病原体进行检测，与传统的细胞分离培养相比，血清学检验的操作步骤简单，其常用的检测方法包括乳胶凝集实验和酶联免疫测试技术等。酶联免疫测试技术的应用能够大幅度提高血清学检测的敏感性和特殊性，不仅能够对检测样本中的抗原进行检测，还能够检测抗体成分。

2020年9月，美国感染病学会（IDSA）发布了COVID-19的诊断之血清学检测指南。

感兴趣的小伙伴可以自行查阅，这里就不再详细介绍。

免疫学检测又被称为免疫磁珠分离技术，该技术能够将病原体中的致病菌和非致病菌分离开，其基本原理为：利用磁珠微球将特定病原体的单一抗原或者多种抗原集合在一起，通过抗原体反应和外部磁场的作用，将致病菌从病原体中分离出来，目前我国已经研制出了多种具有针对性的免疫磁珠，例如有针对李斯特菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌等细菌的免疫磁珠，并且广泛应用于各级科学研究室

以及实验室。同时，采用经免疫磁珠分离技术对病原微生物进行检测所需要的时间段，例如，采用免疫磁珠分离技术分离出的白色念珠菌可以直接使用显微镜进行检测，能够有效缩短 4 h 的检测时间。此外，免疫磁珠分离技术还能够与其他检测技术联合检测病原微生物。

国内呼吸道病原体检测的热度逐渐升温，主要原因为国内疫情爆发初期流感样症状患者混入新冠感染者，很难通过临床症状予以区分，所以当时发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）》就指出：新型冠状病毒肺炎主要与流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒等其他已知病毒性肺炎及肺炎支原体感染鉴别，尤其是对疑似病例要尽可能采取包括快速抗原检测和多重PCR核酸检测等方法，对常见呼吸道病原体进行检测。也因此，国内外的一些企业开始加速布局，抢占风口。NMPA对相关试剂盒的批准也是创下新高，所以，这里小编给大家介绍下疫情爆发之初到目前获NMPA批准的主要试剂盒及其企业信息（如需补充其他产品信息，请在留言区留言）：