发光免疫分析仪组成、工作原理、特点和维护介绍

发光免疫技术是将发光反应与免疫反应相结合，以检测抗原或抗体的方法。它采用微量倍增技术，敏感度、特异性好；检测的范围非常广泛，从传统蛋白质、激素、酶到药物均可检测。临床应用较多的是全自动化学发光免疫分析仪、全自动微粒子化学发光免疫分析仪和全自动电化学发光免疫分析仪 。

发光免疫分析仪的基本结构

1.全自动化学发光免疫分析仪的组成

1）主机部分 是仪器的运行反应测定部分，包括原材料配备、液路、机械传动、光路检测、电路部分。

原材料配备部分包括反应杯、样品盘、试剂盘、纯净水、清洗液、废水在机器上的贮存和处理装置；液路部分包括过滤器、密封圈、真空泵、管道、样品及试剂探针等；机械传动部分包括传感器、运输轨道等；光路检测部分包括光源、分光器件、光电倍增管；电路部分包括电源和放大处理系统及线路控制板。

2）微机处理系统为仪器的关键部分，是指挥控制中心。

其功能有程控操作、自动监测、指示判断、数据处理、故障诊断等，并配有光盘。主机还配有预留接口，可通过外部贮存器自动处理其他数据并遥控操作，用于实验室自动化延伸发展。

2.全自动微粒子化学发光免疫分析仪的组成

1）样品处理系统 包括传送舱和主探针系统，负责将标本、试剂、缓冲液加入到反应管中。

2）实验运行系统 即流体系统，由冲洗液、废液、底物泵及阀、真空泵、贮水罐、液体箱和探针冲洗塔组成。

3）中心供给和控制系统 由反应管支架、反应管供给舱、恒温带和光电读取舱组成。负责传送反应管，并且在传送过程中通过恒温带把反应管加热到一定温度，当恒温过程完成后，由光电识别装置把光信号转变为电信号。

4）微电脑控制系统 由打印电路板、电源、硬盘驱动器、软盘驱动器、重启动按钮和内锁开关组成。外周设备包括彩色监视器、打印机、键盘、外部条码识别笔、外部条码扫描器及连接臂。可对仪器进行相应指令操作和数据的读取并存档。

3. 全自动电化学发光免疫分析仪的组成

主要由样品盘、试剂盒、温育反应盘、电化学检测系统及计算机控制系统组成，可分为三个单元模块。

1）控制单元就是一台完整的计算机，并配有支架及打印系统。

2）核心单元主要由条形码阅读器、标本舱位、标本架转盘、模块轨道等组成。

3）分析模块是检测系统的核心，主要包括预清洗区、测量区、系统试剂区、试剂区、耗品区 。

发光免疫分析仪的工作原理

1. 全自动化学发光免疫分析仪

化学发光免疫分析技术又称为微量倍增技术，包括两种方法：

竞争法：多用于测定小分子抗原物质。用过量包被磁颗粒的抗体，与待测的抗原和定量的标记吖啶酯抗原同时加入反应杯温育，使标记抗原与抗体(或待测抗原与抗体)结合形成复合物。

夹心法：多用于测定大分子的抗原物质。标记抗体与被测抗原同时与包被抗体结合，生成包被抗体-测定抗原发光抗体的复合物。仪器利用某些化学基团标记在抗原或抗体上，该化学基团被氧化后形成激发态，在返回基态的过程中释放出一定波长的光子，光电倍增管将接受到的光能转变为电能，以数字形式反映光量度，再计算测定物的浓度。

2. 全自动微粒子化学发光免疫分析仪

应用经典的免疫学原理，采用单克隆抗体试剂，以磁性微粒作为固相载体，碱性磷酸酶为标物，发光剂采用3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷（AMPPD) ,小分子物质采用竞争法或抗体捕获法进行测定，而大分子物质采用夹心法行测定。

3. 全自动电化学发光免疫分析仪

将待测标本与包被抗体的顺磁性微粒和发光剂标记的抗体混合在反应杯中共同温育，形成性微珠包被抗体-抗原-发光剂标记抗体复合物。当磁性微粒流经电极表面时，被安装在电极下的磁铁吸引住，而游离的发光剂标记抗体被缓冲液冲洗走。同时在电极加电压，使发光标记物三联吡啶钌[ Ru( bpy)3]2+在电极表面进行电子转移，产生电化学发光，光的强度与待测抗原的浓度成正比。抑制免疫法用于小分子量蛋白质抗原检测；夹心免疫法用于大分子量物质检测。

发光免疫分析仪的特点

1.全自动化学发光免疫分析仪

采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合，是一个全自动、随机存取、软件控制的智能分析系统。在反应体系中，固相载体用磁性颗粒。其直径仅1.0um，大大增加了包被表面积，使抗原或抗体的吸附量增加，反应速度加快，清洗和分离也更加简单。具有操作灵活，结果准确可靠，试剂贮存时间长，自动化程度高等优点。

2.全自动微粒子化学发光免疫分析仪

采用微粒子化学发光技术对人体内的微量成分以及药物浓度进行定量测定，具有高度的特异性、敏感性和稳定性等特点。

3.全自动电化学发光免疫分析仪

电化学发光免疫分析是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，属于第三代化学发光免疫分析技术。与其他免疫技术相比具有十分明显的优点：由于所用标记物三联吡啶钌可与蛋白质、半抗原激素、核酸等各种化合物结合，因此检测项目很广泛；由于磁性微珠包被采用“链霉亲和素生物素”新型固相包被技术，使检测的灵敏度更高，线性范围更宽，反应时间更短  。

发光免疫分析仪的维护

先进的设备需要正确的维护。日保养、周保养和定期的系统检测是保障仪器正常运转的前提。全自动化学发光免疫分析仪的维护包括以下几个方面。

1.日保养：每天要保持机器外壳干净，以免灰尘进入仪器。做日常常规保养之前一定要检系统温度状态、液路部分、耗材部分、废液罐、缓冲液等是否全部符合要求，之后再按保养程序清洗系统进行保养操作。

2.周保养：检查主探针上导轨，检查完毕后用无纤维拭子清洁主探针下导轨，然后按要求在主菜单下进入保养程序进行特殊清洗，清洗完毕后用乙醇拭子清洁主探针上部，然后检查废夜罐过滤器。检查孵育带上的感应点是否有灰尘，用无纤维拭子擦干净。每周保养后一定要做系统检测，以确保系统检测数据在控制范围内。

3.月保养：每月用专用不锈钢小刷刷洗1次主探针、标本采样针、试剂针的内部以除污物。由于针内部空隙小，刷洗后用注射器吸取生理盐水反复冲洗针内部，使污物全部冲干净，针外部可用酒精擦拭干净 [1]  。

发光免疫分析仪的常见故障处理

化学发光免疫分析仪自动化程度较高，都具备自我诊断功能。一旦有故障发生时，仪器一般能自动检测到，显示错误信息并伴有报警声。

常见故障主要有以下几个方面。

1.压力表指示为零：进行真空压力测试，能听到泵的工作声音，但压力表指示为零。首先检查废液瓶所接的真空管，测试真空压力，判断该故障是否因漏气或压力表损坏引起。检查各管道的接口有无漏气，检查相关的四只电磁阀(在真空压力测试时，这四只电磁阀不工作，为关闭状态)，对有问题的管道或电磁阀及时修复或者更换。

2.真空压力不足：进行真空压力测试，若测试结果正常，可知是因真空传感器检测不到真空压力引起。该机的压力测试由两个传感器分别检测高、低压力，对有问题的传感器进行调整或清洗后，再次测试真空压力，压力正常后调节传感器螺丝使高、低压力指示在规定范围内。

3.发光体错误：检查发光体表面发现有液体渗出，该故障分三步检查：检查废液探针、相关管路及清洗池是否有堵塞、漏液；检查加样电磁阀、排液电磁阀，电磁阀，有污物会引起进水或排水不畅；检查与废液探针管路相连接的碱泵清洗管路是否有漏气以及碱泵是否有裂缝。

4.轨道错误：该故障因标本架在轨道中错位而使轨道无法运行引起，因轨道很长，而且密闭不易拆，一般先检查与轨道相接的水平升降机，如果正常，再检查轨道，只要取出错位的标本架，故障即可排除 。

（来源：互联网，如有侵权请联系编辑）