光学法在体外诊断分析方法中占据着重要的位置,大致包括无需光源“激发”和有光源“激发”的光学法。例如化学发光,包括电化学发光、酶促化学发光、直接化学发光等,就不需要光学“激发”,而更多的光学法则被光源“激发”。 不同的仪器,使用的原理也不相同。今天研sir就来为大家盘点一下目前体外诊断仪器中相关的方法学。 欢迎关注IVD开发者联盟,聊天,交流,最重要的是,交个朋友,不要钱。 1 ● 比浊法 又称浊度测定法。 测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。 当光束通过一含有悬浮质点的介质时,由于悬浮质点对光的散射作用和选择性的吸收,使透射光的强度减弱。在比浊法中,透光度和悬浮物质浓度的关系类似于朗伯-比尔定律的数学式: 公式中s为浊光度(或浊率),表示由于悬浮物的散射作用而引起的光强度衰减;I0和I分别为入射光强度(通过纯溶剂)和透射光强度(通过混浊样品);b为光程长度;c为悬浮质点的浓度;K为常数,有时又叫浊度系数,其值与粒子的大小、形状、入射光的波长、悬浮物和介质的折射率有关。 通常比浊法又可以分为透散比浊和散射比浊。 典型的仪器有:凝血分析仪、特定蛋白分析仪等 2 ● 分光光度法 提到分光光度法,就不得不提朗伯-比尔定律(Lambert-beer)。 典型的仪器有:酶标仪、生化分析仪等。 3 ● 光致发光法 光致发光是分子受光子激发后发生的一种去激发过程。 在吸收紫外和可见电磁辐射的过程中,分子受激跃迁到激发电子态。多数分子将通过与其他分子的碰撞,以热的形式散发掉多余的这部分能量;部分分子则以光的形式释放出这部分能量,放射出光的波长不同于所吸收辐射的波长。后一种过程称为光致发光。即市面上通常意义上的荧光免疫分析仪。 典型仪器:荧光免疫分析仪、时间分辨免疫分析仪、流式细胞仪、实时荧光定量PCR等 4 ● 颜色识别法 利用显色反应,使尿液、胶体金等显示不同的颜色,利用不同颜色对于光的反射不一样来判断颜色。 典型仪器:胶体金分析仪、尿液分析仪等。 |