IVD注册资料大解密丨定性检测试剂精密度评估方案设计探讨

定性检测试剂精密度研究应考虑到运行内的变异和运行间、日内、日间、批次间、操作者间、仪器间和地点间的变异。精密度实验一般包括重复性和再现性试验。重复性表示上述影响因素变化最小的情况（上述影响因素均不变）下，对待测样本进行重复检测，并查看检测结果的一致性。再现性则需考虑不同试剂批次间、不同操作者间、不同仪器间、不同地点间和日间等多因素，且每个因素一般也会考虑2~3个水平。所以较重复性，再现性实验设计更为复杂些，因此在本篇中小编主要想和大家探讨一下再现性实验设计方案。

假设我们需要设计不同试剂批次间、不同仪器间和不同操作者间的再现性的实验方案，且要求上述每个因素需设置3个不同水平，即有3个批次的试剂、3个操作者、3个仪器。如果实验因素较少例如一个或2个因素时，我们可以对不同因素的所有可能的水平组合均做实验，这种称为全面实验。但当因素较多时，虽然理论上仍可采用前面的方法进行全面实验，但是在实际上会遇到实验次数太多的问题。如上述三因素三水平的问题，所有不同水平的组合有3³=27种，在每一种组合只进行一次实验，也需要做27次。如果再考虑不同地点、不同日期等更多因素，则全面实验的次数可能大得惊人。因此在实际应用中，对于多因素做全面实验是不现实的。于是可以考虑是否选择其中一部分组合进行实验，这就要用到实验设计方法选择合理的实验方案，使得实验次数不多，但也能得到等效的结果。

正交表是一系列规格化的表格，它的学名叫正交阵列。正交拉丁方和Hadamard矩阵是它的前身。正交表是实验设计的基本工具，它是根据均衡分布的思想，运用组合数学理论构造的一种数学表格。均衡分布思想是正交表的核心，虽然远在古代就有，但只是在近代才与生产科研实际相结合，产生了拉丁方，正交表，显示出它的巨大威力。正交表每个表格都有一个记号，如L₈（2⁷）、L₉（3⁴）等，表1为L₉（3⁴），以L₉（3⁴）为例，L表示正交表，9表示正交表的行数，表示需要实验的次数；4是正交表的列数，表示最多可以安排的因素的个数；3是因素水平数，表示此表可以安排三水平的试验。

因此，上述3因素3水平的实验方案设计可以选择正交表L₉（3⁴）进行设计，此时实验组合数从全面实验时27个组合减到仅9个组合就可以等效评价不同因素不同水平条件下的再现性情况。在实际操作中我们先进行表头设计，即将三个因素3个批次的试剂（Kit）、3个操作者(operator)、3个仪器(instrument)分别放在L₉（3⁴）表的任意三列上，如将Kit、operator、instrument分别放在第1、2、3列上。得到如下表9个实验组合：

表2.不同试剂-不同操作员-不同仪器再现性实验设计

接下来就是根据试剂盒情况选择合规且合理的样本，并对每个样本按上表2中9个组合条件下进行检测，检测次数根据实际情况而定，评价指标也一样，根据各试剂盒关键技术指标进行选择，比如检测结果是否正确，最后可得出待测试剂再现性性能是否满足要求。