IVD产品性能评估系列--精密度评价

自1988年美国发布临床试验修正法规，明确要求对一个检测系统分析性能要从以下几个指标进行描述：

今天小编就精密度，结合国内相关法规及指导原则，谈谈EP5中对精密度的要求。

精密度是指规定条件下所获得独立测量结果的接近程度，通常我们只能定量衡量测量结果的不一致性即不精密度。

这里要提醒大家与时间相关的精密度组成部分主要有重复性（批内精密度）、批间精密度、日内精密度、日间精密度和室内精密度（仪器精密度），后者在我国也称为总精密度。在这些精密度成分中，重复性及室内精密度通常最有意义。

常规方法1：目前我国最普及的精密度评价方案是对同一份稳定的样品作多次测量，求重复测量值的均值和标准差以及变异系数。重复次数一般要求20次，但也有个别指导原则要求重复检测次数为10次。要求变异系数（CV）低于10%（人工操作低于15%）即可。比如《孕酮检测试剂注册技术审查指导原则》，《降钙素原检测试剂注册技术审查指导原则》，《YY-T 1183-2010 酶联免疫吸附法试剂（盒）》等，小编不一一列举，文中都要求重复检测10次。若在一批内的重复测量，这是批内不精密度。虽然大量指导原则和大部分厂家都是按此程序对精密度进行检测，但EP5认为这种方案中存在缺陷，因为其批内不精密度是在很短时间的抽样的结果并不代表真正的批内不精密度。

常规方法2：另外有的实验方案将精密度评估每天检测1次，连续20天检测，其实这种方案也有其弊端。这种方案得到的不精密度为总不精密度，经常被人错误的认为是日间不精密度，此外这种方案本身未将批内，批间的不精密度分离出来，因此只是代表稍差的总不精密度。

EP5-A2推荐采用2×2×20的试验方法，即每天检测2批，每批检测2次，共进行20天，对得到的80个有效的数据进行统计分析，就可以得到批内、批间、天数以及总不精密度。此外通过试验所得到的不精密度数据后，如果与声明的要求不一致，仍可通过检验来判断是否有显著差异，如果无显著差异则精密度是可以被认可的，这可能与我们常规的理解和做法是有区别的。

小编从已实行指导原则及国内部分行标对精密度的性能评价要求出发，简述我国目前大部分厂家测精密度的方案及方案存在的缺陷。并不是想批判什么，恰恰相反是，而是想从EP5-A2文件中发现目前方案的不足以及我们可以更进一步的方向。随着中国加入IMDRF并担任更重要的角色，国内法规也会日益与FDA和欧盟接轨并一致，目前法规对稳定性的要求已经基本与EP要求相同，我想在不远的将来，其他的性能指标也会逐步向欧盟要求靠近并一致。其中精密度一定会是其中的一环。

1. 试剂和校准品：整个试验过程应使用同一批次的试剂和校准品，防止其他变异因素。

2. 实验样本：样本尽可能选与临床样本相类似的基质。使用两个浓度样本进行检测，其中一个样本浓度接近“医学决定水平”。

使用2个浓度实验样本，每天检测2批，每批检测2次，共进行20天。每个浓度收集80个有效数据。对数据进行统计学分析，得出结论。此外为保证质量控制，精密度评价试验要经过以下几个阶段。

1. 仪器熟悉阶段：为避免在实际测试过程中出现问题，操作者应熟练掌握操作程序，此阶段数据不进行最终的统计学分析，仅供参考。直到操作者熟悉流程。

2. 方法熟悉阶段：此阶段为正式实验阶段，每天分2批进行，每批重复测2次，每批至少间隔2小时，每个浓度收集4个有效数据。此阶段时长5天，收集的数据作为最终的统计数据。

3. 初步评估阶段：方法熟悉阶段末期，对质控品连续测量20次（2个浓度），然后计算变异系数，如果有差异要找出原因，如果没有差异继续下步实验。

4. 后继试验阶段：方法熟悉阶段过后，该实验仍要持续15天。试验方法同方法熟悉阶段。每5天需在质控图中重新计算质控线并检验所有数据的可接受性。

在进行精密度性能评估时，EP5推荐要进行必要的质量控制。具体方案如下：

每次测量中至少使用1个适当浓度的质控样本。在方法熟悉阶段建立初步质控图，采取最初5天的质控数据计算平均值标准差，以±3S作为警告线，±4S作为失控限（此处小编要特殊说明，一般情况下L-J质控图都以±2S作为警告线，±3S作为失控限，但由于方法熟悉阶段属于初步预估，统计效能较低，故扩大警告线和失控限范围）。

综上所述，就是小编EP5-A2对精密度的理解，当然鉴于此文件验证的繁琐以及数据统计的繁杂，EP文件中EP15也对精密度的评价方案进行了简化，如果读者有对EP15感兴趣的我们可以再下一篇文章再进行分享。EP5对定量测量方法提供了系统性的精密度性能评价方案，很值得同行去研究其内涵。另外小编就EP5推荐的方法做成了内含计算公式的Excel表，大家如有需要可以关注小桔灯网微信公众号，对话框回复“精密度”，即可以下载。

表一：精密度实验记录表

表二：精密度实验记录表