“解读”HPV疫苗明确HPV分型检测

2009年，政府“两癌筛查”公益项目开始走入公众视野。宫颈癌筛查，及HPV分型检测众所知悉。2016年至2018年，2价、4价和9价HPV疫苗连续获批在中国大陆上市。HPV疫苗的获批将宫颈癌筛查，特别是HPV分型检测推向又一个高潮。

HPV疫苗时代来临，又如何看待HPV分型检测呢？首先可从下列表中看到2价、4价和9价HPV疫苗的区别：

结论：HPV疫苗从2价到4价再到9价，在HPV的型别和数量两方面均发生了变化。

关于HPV型别，根据其与宫颈癌的相关性，HPV可分高危型和低危型。4价和9价HPV疫苗较2价HPV疫苗增加了低危型HPV（HPV6/11型，与生殖器疣密切相关）。而HPV型别数上，高危型HPV从2种增加到了7种。

HPV疫苗发展过程中在型别和数量上的变化有无意义呢？

首先看看学术文献中的关于HPV型别的报告：

研究人员陈娟娟等[1]，采集2015年6月至2017年6月健康体检且自愿接受HPV筛查的4582名妇女，采用流式荧光杂交技术（上海透景生命科技股份有限公司）检测27种HPV基因型（明确区分17种高危型和10种低危型），并对HPV感染率、基因型及年龄分布进行比较分析。结果，检出HPV阳性568例（12.4%），其中HPV单一型感染479例（84.3%），多重型别感染89例（15.7%）。HPV高危型426例，以HPV53型、HPV52型、HPV58型、HPV16型、HPV18型最为常见，HPV低危型142例，以HPV61型、HPV44型、HPV6型、HPV11型型最为常见。

结论：健康体检女性人群，不仅有高危型HPV感染，也有低危型HPV感染。因此，健康体检人群是可以同时进行高危型HPV和低危型HPV检测的。同时评估4价或9价HPV疫苗的有效性，也需要同时进行高危型HPV和低危型HPV的检测。

接着，再来看看9价HPV疫苗较2价和4价HPV疫苗增加的5种高危型HPV：

研究人员Yuli Wang等[2]，回顾分析1166例LEEP手术患者，对HPV分型检测（采用上海透景生命科技股份有限公司的流式荧光杂交法），宫颈细胞形态学，组织学等进行研究分析。结果发现，前6种高危型HPV分别是HPV16型、HPV58型、HPV52型、HPV33型、HPV18型、HPV31型。与高危型HPV阴性女性相比，HPV16型、HPV33型、HPV58型阳性女性患CIN2+风险依次为OR = 5.10, 95% CI = 2.68-9.70; OR = 3.09, 95% CI = 1.39-6.84; OR = 3.57, 95% CI = 1.85-6.89（简单理解：危险程度方面HPV16型、HPV33型、HPV58型占前三）。

宫颈细胞形态学，是宫颈癌筛查的一种传统方法。HPV分型和细胞形态学联合检测，可以提高筛查效率，更高质量地锁定有HPV感染且感染后继续发展的少数人群。

从宫颈细胞形态学与HPV型别的关联性可以看到HPV58型、HPV52型、33型、HPV31型在宫颈癌的发生中较其它HPV型别扮演了更为重要的角色。

备注：NILM：上皮内病变或恶性肿瘤阴性；ASC-US：无明确诊断意义的非典型鳞状细胞；LSIL：低度鳞状上皮内病变；HSIL：高度鳞状上皮内病变；ASC-H：非典型鳞状上表皮细胞-不能排除高度鳞状上皮内病变；AGC：不典型的腺上皮细胞。百分比数据（%）

上表数据说明：HPV16型是最常见型别。在ASC-US，LSIL和HSIL中HPV58型仅次于HPV16型；在HSIL中HPV33型和HPV52型接近，分别为第3和第4；在NILM中HPV52型仅次于HPV16型。HPV18型相对较少。

实际上，HPV分型和宫颈细胞形态学检测都是辅助诊断，来筛选“高危人群”。而组织学检测是宫颈癌诊断的金标准。那么“金标准”和HPV分型检测的相关性又如何呢？

根据组织学结果可将患者分为两个组：CINⅠ组和CINⅡ+组（简单理解：CINⅠ组可逆性很大，不需要过多干预；CINⅡ+组，相对严重，可能涉及到手术干预等）。

如下图所示：247例CIN1中，最常见型别 HPV52 型(57/247, 23.1%)。第2-6常见型别分别为：HPV16型 (46/247, 18.6%), HPV58型 (42/247, 17.0%), HPV18型(28/247, 11.3%), HPV33型 (19/247, 7.7%), HPV31型 (13/247, 5.3%). 

备注：Single HR-HPV infection:单一高危HPV感染；

Multiple：HR-HPV infection:多重高危HPV感染

如下图所示：919例CINⅡ+中最常见型别HPV16型 (375/919,40.8%)。第2-6常见型别分别为：HPV58型 (231/919,25.1%), HPV52型(143/919,15.6%), HPV33型(118/919,12.8%), HPV31型(52/919,5.7%),HPV18型(47/919,5.1%)。CIN2+中，前6种HPV共占 88.9% (817/919)。

备注：Single HR-HPV infection:单一高危HPV感染；

Multiple：HR-HPV infection:多重高危HPV感染

回顾2价和4价HPV疫苗与9价HPV疫苗在高危型HPV数量上的差别，原来增加的HPV58型、HPV52型、HPV33型、HPV31型的重要性仅次于HPV16型，它们的“危害性”高于HPV18型。

通过对2价、4价和9价HPV疫苗在型别和数量上变动的“解读”，可以明确：

HPV分型检测十分必要。不仅要进行高危型HPV分型检测，也需要进行低危型HPV分型检测。

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通过宫颈细胞形态学和金标准宫颈上皮组织学的“印证”，我们也清楚地知道不是每个HPV型别都有一样的致病风险，我们需要“区别对待”不同的HPV型别。如果HPV16、18型是“欧美概念”，那么在中国，风险程度高于HPV18型的HPV52、58、33、31型别，可以考虑其与欧美人群中的HPV16、18型有同等重要的位置。

上海透景生命科技股份有限公司的流式荧光杂交法，可以检测27种HPV。具体区分17种高危型和10种低危型，包含了9价HPV疫苗中的HPV型别，完美适合中国广大女性的检测需求。

流式荧光技术，是基于编码微球和流式技术的一种临床应用型高通量发光检测技术，又称悬浮阵列、液态芯片、液芯以及xMAP技术等。该技术核心为单微球超敏检测；有机整合了荧光编码微球、 激光检测、应用流体学、高速数字信号处理技术等多项技术，具有多指标联合检测、通量高、速度快、标本用量少、既能检测蛋白也能检测核酸、既适用于临床检验也适用于科研等多种优点，代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向。

流式荧光杂交法用于HPV检测的特点：

上海透景生命科技股份有限公司研发生产的《人乳头瘤病毒核酸分型检测试剂盒（流式荧光杂交法）》荣获CFDA和CE双认证，并通过中国临检中心和世界卫生组织HPV室间质评。

【参考文献】

[1] 陈娟娟等.温州地区2015-2017年女性体检人群人乳头瘤病毒感染特征分析[J]。2018年8月第25卷第16期：59-60.

[2] Yuli Wang,et al.Distribution and role high-risk human papillomavirus genotypes in women with cervical intraepithelial neoplasia:A retrospective analysis from Wenzhou,southeast China[J].Cancer Medicne.2018;7:3492-3500.