关于医学实验室管理的问与答（一）：SOP文件与作业指导书

一

标准操作程序的编写

(一)、SOP的含义是什么？

SOP是标准操作程序的英文缩写（Standard Operation Program）。

(二)、SOP文件应包括哪些主要内容？

SOP文件分为不同的类型，在内容上也有所不同，对某一个检测项目的SOP应包括以下内容：实验原理或检验目的；样品的种类及采集的要求；使用的试剂；使用的仪器；操作步骤；质量控制程序；结果解释及临床价值；方法的局限性；参考文献；如是使用设备的SOP应包括：操作的原理和组成；使用的目的和范围；仪器的校正程序；检测标准的操作步骤；质量控制程序；设备的功能；软件设置；操作过程；注意事项；设备的保养和维护；故障及排除等。

二

作业指导书

(一)、何谓作业指导书？

作业指导书是工作时的规程或规范类的文件，如对某一检验方法、校正程序、仪器设备维护过程，可用于直接指导操作人员进行各种质量控制活动时的执行性文件。

(二)、微生物学实验室的作业指导书主要有哪些内容?

主要有不同类细菌鉴定操作规程;细菌纸片法药敏试验操作规程;细菌对抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)测定的操作规程;细菌鉴定和药敏试验室内质量控制的程序;染色方法的操作规程;培养基制作的操作规程;所用每一种设备的操作规程等。

(三)、如何设计作业指导书的格式?

临床微生物作业指导书中的一项试验应成为一个独立的程序，至少应有页眉，页眉应标明指导书的编写者，负责人、编写日期、仪器或试验的名称;正文内容应包括试验或仪器的工作目的;操作的内容、步骤、方法、结果判断、结果解释；质量控制的要求；操作注意事项；流程；参考文献（应用标准的来源、版本）。

(四)、作业指导书多长时间更新较为合理?更新的程序?

作业指导书应随时更新对临床有误导的试验,建议3-5年作一次大的调整编制。作业指导书的更改不能由某一操作者任意改动,首先应由临床医生或操作者提出更改或取消该试验的理由，或由于目前的方法引起结果误差的实例，实验室主任与相关人员定期对存在的问题进行讨论，决定某一试验或方法是否继续采用或用新的替代方法。

(五)、作业指导书和SOP文件有什么区别?

作业指导书是一种规范类的执行性的文件,指导操作人员进行各种业务活动。从功能上讲SOP文件与作业指导书有非常多的相似性，但SOP文件需要按一定的要求、内容、格式、标准进行编写，SOP文件的编写的内容更具操作性和实用性。如关于检验项目操作程序ISO15189：或ISO17025 文件的相关部分对检验规程的编写均有一定的要求，而且要求其内容必须与当前的检验方法和操作步骤完全相一致。

(六)、如何编写细菌鉴定的SOP文件?

细菌鉴定的SOP可以按细菌类别为基础，写出每一类细菌鉴定的程序和主要鉴定试验的SOP文件，包括细菌鉴定的染色反应、初步鉴定试验如触酶试验、氧化酶试验等，鉴定细菌的主要生化反应、血清学反应、动物试验直到鉴定完成。如按不同的样品类型作为主干线编写，在编写上述内容前应包括细菌分离程序的SOP文件。

(七)、如何编写痰及下呼吸道样品分离鉴定的SOP文件？

应包括以下内容：

1）概况：正常人体的下呼吸道是无菌的,上呼吸道有正常菌群栖居。下呼吸道的分泌物在经上呼吸道排出时,常受口腔正常菌群污染。当病人出现咳嗽、咳痰、呼吸困难、咯血等症状时应采样检查，采集抗生素使用前样品。检样首先作显微镜检查，细菌培养。对分离的病原体应尽力鉴定到种并按CLSI抗微生物药敏试验标准操作，为医生选择抗生素提供参考。检验材料与设备:要标明该材料来源 如：抗酸染色液：购自生物梅里埃诊断产品（上海）有限公司。要列出材料、设备的名称和来源。

2）样品检验步骤：从样品的采集、前处理、接种分离、初步鉴定、种的鉴定、药敏试验以及检验结果报告方式均应按规范编写，提供给操作者遵循。

3）临床意义：判断痰培养分离的细菌是致病菌或条件致病菌十分重要，某些国家的指南提示：在涂片和培养见到同样的细菌并有细胞吞嗜现象或细菌涂片中每一油镜视野菌数大于20个或占所有细菌的50%以上的优势菌有最大可能是致病菌。类似的提示应在SOP文件中体现。

4）操作注意事项：采集样品以清晨为佳，为减少口腔正常菌群污染样品，采集前应先用漱口液充分漱口，并漱口后立即留痰；样品采集后应立即送检，以防某些细菌在外环境中死亡。做结核分枝杆菌和真菌培养的样品不能及时送检时，放4C保存，以免杂菌生长等。

(八)、如何编写细菌对药物的敏感试验的SOP文件？

对于细菌药敏试验的SOP文件的编写应包括纸片扩散方法和最低抑菌浓度（MIC）测定；每一种方法都应包括常规药敏试验药物种类的选择;试验原理;药敏试验的指征;该方法适用的范围;所需要的材料和设备;不同类细菌的药敏方法和步骤和用培养基的差异;质量控制的方法;培养基的配制及用途;标准比浊管的配制;目前使用标准的版本及参考文献等。

(九)、常用培养基或染色液质量鉴定文件应包括哪些内容？

无论是商品购买或自制的实验材料，都应有质量鉴定的过程。质量鉴定的文件内容应包括该项目的概述、适用范围、所需的材料、操作步骤、结果解释、报告方式和参考文献等。几乎包括全部日常所用的材料，如革兰染色液或抗酸染色液质量控制程序，染色液质控品使用程序；各种培养基质量鉴定操作程序等。

(十)、培养基的质量鉴定操作规程应包含哪些内容？

以血琼脂为例：

1）概述：阐明血琼脂的运用目的、质控方法、结果判断。

2）适用范围；

3）材料；

4.）检测方法，

5）结果解释，

6）报告方式，

7）参考文献。

通过对其一般性状（厚度、硬度、PH值、表面平整度、湿度）的判别和无菌试验；通过金葡菌、肺炎链球菌、溶血链球菌标准株在血平板上生长情况的观察，判断血琼脂培养基质量是否合格。

(十一)、临床微生物室应用设备的SOP文件应包括哪些项目？项目书写应包含的内容?

临床微生物室的设备的SOP文件应包括所有的设备，如分析天平、显微镜、麦氏标准管、冰箱、普通培养箱、高压蒸汽灭菌锅、二氧化碳培养箱、生物安全柜、自动、半自动或全自动细菌鉴定系统等。由于不同的设备功能和使用范围不同书写的项目会稍有不同，但总的内容基本相同。每一个文件中应包括该设备的产品名称、型号；原理及检测范围；参数的设置及标准；开机与关机程序；操作程序；设备的保养和维护；常见故障的处理；基本技术性能；运行环境要求（电源、温度、湿度、场地大小等）；操作流程图等。